ตามที่กล่าวไว้ข้างต้นหม้อนึ่งความดันจะเท่ากับหม้ออัดความดัน ความแตกต่างก็คือการกระทำของ
หม้อนึ่งความดัน มีความรุนแรงมากขึ้น
เครื่องมือที่จะฆ่าเชื้อจะถูกเก็บไว้ในห้องบริเวณท้องของหม้อนึ่งความดัน ทันทีที่เปิดหม้อนึ่งความดัน ไอหมอกหนาทึบจะถูกส่งเข้าไปในห้อง เมื่อถึงจุดนี้ ความดันและอุณหภูมิเริ่มเพิ่มขึ้น โดยทั่วไปแล้ว หม้อนึ่งความดันส่วนใหญ่จะต้องการรักษาอุณหภูมิไว้ที่ประมาณ 120°C (ประมาณ 250°F)
อุปกรณ์ยังมีวาล์วและท่อจำนวนหนึ่งเพื่อให้ไอน้ำเข้าไปในห้องเพาะเลี้ยงและนำอากาศที่ปนเปื้อนไปยังทางออกโดยตรง นอกจากนี้ ไม่จำเป็นต้องใช้อุณหภูมิ 120°C กับ 15 นาทีร่วมกัน ใช้การผสมผสานที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับวัสดุภายใน
ตัวอย่างเช่น เป็นที่ทราบกันว่าหม้อนึ่งความดันใช้อุณหภูมิ 134-138°C เป็นเวลา 3 นาที ในทำนองเดียวกัน การรวมกันที่เหมาะสมอื่นๆ ยังอาจถูกนำมาใช้อีกด้วย
สภาวะเหล่านี้จะคงอยู่ประมาณ 15 นาที ซึ่งเพียงพอที่จะฆ่าเชื้อจุลินทรีย์และสปอร์ทั้งหมดได้ กระบวนการนี้ทำลายภายในของจุลินทรีย์และยุติการดำรงอยู่ของมันอย่างมีประสิทธิภาพ หลังจากเวลาที่กำหนด ไอน้ำจะถูกเอาออก และความดันจะค่อยๆ ลดลง
กระบวนการนี้ขึ้นอยู่กับการแทนที่อากาศที่ปนเปื้อนในห้องเพาะเลี้ยงด้วยไอน้ำอิ่มตัว และบังคับให้ไอน้ำนั้นคงอยู่ เพื่อให้การเปิดรับแสงเป็นเวลานานทำให้มั่นใจได้ถึงความปลอดเชื้อที่มีประสิทธิภาพ สิ่งสำคัญคือต้องทราบว่าไอน้ำไม่ร้อนเกินไปหรือมีความชื้นเกิน 5%
